薄層層析的操作方法是什么(甲氧胺鹽酸鹽),rf值影響因素有哪些(氰霜唑)
告訴你薄層層析的操作辦法以及rf值影響因素。薄層層析是近年來發展起來的一種微量、快速而簡略的色譜法,它兼備了柱色譜和紙色譜的優點。一方面適用于小量樣品(幾到幾十微克,甚至0.01μg)的分離;另一方面若在制作薄層板時,把吸附層加厚,將樣品點成一條線,則可分離多達500mg的樣品。因此又可用來精制樣品。
薄層層析操作辦法
薄層層析法以吸附層析使用最為普遍。常用的吸附劑為硅膠、氧化鋁等。薄層層析和其他層析法一樣,除吸附法外,也可進行分配、離子交換、分子排阻等機理的層析,即將鋪制薄層的材料相應換為涂以固定相的載體、離子交換劑、凝膠等,其操作與吸附法基本雷同。
制板:鋪制薄層板時,要求基底板潔凈平整,可用干法或濕法鋪制。現常用濕法制板,即將吸附劑和粘合劑(如燒石膏)按一定比例混合,加入適量水調勻,用涂布器將此勻漿遲緩地移過基底板,放置晾干,再經適當烘烤活化后即可使用。如不加粘合劑和水,直接將吸附劑平均地鋪成薄層,則為干法制板。現在市場醫藥中間體上已有各種制康復的薄層板出售,統稱預制板。
展開:有多種方式,以上行法最為常用。將薄層板垂直或傾斜放置,將展開溶劑加于低部,使之自下向上移動。下行法則為用濾紙將溶劑引至薄層上端,使其自上向下流動。平行展開時,將板平放,溶劑被吸上至薄層板點有樣品的一端,進行展開。使用圓形薄層板時,將樣品點在圓心附近,使溶劑自圓心向圓周方向移動,稱為環形展開或徑向展開;將樣品點在圓周位置,使溶劑自圓周向圓心移動的為向心展開,適用于f值大的組分的分離。將點樣品處附近的吸附劑刮去,使溶劑只能通過樣品點附近的較窄局部前進展開,因而溶劑前緣呈弧形的展開方式,也稱徑向展開,這種方式對較難分離的組分可能效果康復些。
展開一次后取出薄層板使溶劑揮發,再用同一溶劑或換用其他溶劑再次沿此方向展開的稱多次展開。將樣品點在方形薄層板的一角,先沿著一個方向展開,然后將板轉動90°,再沿著另一方向展開的為雙向展開。多次展開和雙向展開都可加強分離效果。
特點:操作簡便,設備簡略,除光密度計外,不需特殊設備,分離效果較康復,工夫較短,一塊板上可同時分離許多樣品。除低沸點物質外,各種無機和有機化合物都可進行分離。
薄層層析rf值影響因素
要分離化合物的結構,濾紙或薄層板的種類、溶劑、溫度等 。