層析柱儀器有哪些(氰霜唑),一般使用方法是什么(甲氧胺鹽酸鹽) | 新材
告訴你層析柱儀器有哪些(氰霜唑)以及一般使用的辦法。層析實(shí)驗(yàn)常用于分離純化蛋白質(zhì)、抗體等。層析柱是層析實(shí)驗(yàn)的主體,可根據(jù)所要分離的樣品的大小、性質(zhì)決定層析柱的直徑尺寸和填充物。
層析柱儀器
1、梯度發(fā)生器:在進(jìn)行校層析時(shí),要用足夠量的起始緩沖溶液淋洗,使末吸附的物質(zhì)洗出,并使充沛均衡,特別是用稀釋法處理的樣品更為必要。然后根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求、再進(jìn)行梯度洗脫或階段洗脫。
2、微量泵:微量泵是一種可自動(dòng)加液或抽液、加壓或抽壓的實(shí)驗(yàn)室常規(guī)設(shè)備。它是液相色譜中不可缺少的部件。它的基本原理很簡略:由一可作無級(jí)調(diào)速的步進(jìn)電機(jī)驅(qū)動(dòng)一組滾輪,擠壓—根硅橡膠管,使層析溶劑以恒定的流速通過層析柱,扭轉(zhuǎn)電機(jī)速度或采用不同內(nèi)徑的硅橡膠管,可使流速在適當(dāng)范圍內(nèi)任意調(diào)節(jié)。
3、檢測(cè)儀:在液相色譜中,最常用的檢測(cè)器是紫外檢測(cè)器,多用低壓汞燈作光源,提供254nm單波長檢測(cè)用,如再附加一根特制的石英磷光標(biāo)作為波長轉(zhuǎn)換器,則可成280nm檢測(cè)器。
4、局部收集器:局部收集器可與層析柱、層析儀、檢測(cè)器和電泳儀等分離剖析儀器配套使用。自動(dòng)地對(duì)所需液體進(jìn)行各種方式的收集,從而省掉化學(xué)剖析制備工作中大量繁瑣的工作。
5、程序控制器:由于柱層析工夫較長,需要有能在數(shù)分鐘至數(shù)十小時(shí)內(nèi)按工夫或條件控制10個(gè)通路左右的程序控制器。利用這種程序控制器可按需要編排各種不同的工作程序,使它所控制的泵、閥、梯度發(fā)生器、檢測(cè)器及收集器等協(xié)調(diào)地啟動(dòng)或終止工作。這樣就可使儀器預(yù)熱,柱體用甲乙兩種溶液預(yù)洗,加樣后梯度洗脫,洗脫液自動(dòng)檢測(cè)及收集,再用甲乙兩種溶劑回收柱體,廢洗滌液自動(dòng)流入廢液收集瓶,以及循環(huán)操作或工作結(jié)束自動(dòng)停機(jī)等工作程序準(zhǔn)時(shí)地依次完成。它的作用相少于汁算機(jī)中的“中央處理機(jī)”,是十分重要的。
層析柱使用辦法
柱層析和TLC是有機(jī)化學(xué)工作者必須下苦功夫的兩項(xiàng)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。這兩項(xiàng)技術(shù)掌握與否,對(duì)于提高實(shí)驗(yàn)的效率至關(guān)重要。常見的例子是:在柱層析時(shí),由于層析柱中的硅膠填料裝得不平均(沒有填嚴(yán)實(shí)),使得柱子在淋洗過程中就因?yàn)槌霈F(xiàn)太多氣泡變花,導(dǎo)致分離效果不康復(fù)。更常見的例子是:層析柱雖然裝得不錯(cuò),但是由于淋洗劑選擇不恰當(dāng),結(jié)果導(dǎo)致幾十毫克產(chǎn)品,用了幾百毫升淋洗劑都還沒有完全分離。分離同樣的東西,熟手可能只需要半個(gè)小時(shí),而一個(gè)層析技術(shù)不過關(guān)的人可能半天都不能得到純品。由此可見,這兩項(xiàng)技術(shù)掌握與否,對(duì)于提高工作效率,減輕工作量,減少有機(jī)溶劑的使用,從而對(duì)身心健康和環(huán)境愛護(hù)都有明顯的作用。柱層析關(guān)鍵在于柱子是否裝康復(fù)和淋洗劑是否選擇恰當(dāng)。而淋洗劑的選擇則是通過TLC確定。這里要指出的一點(diǎn)是:TLC的作用除了跟蹤反應(yīng)進(jìn)程,檢測(cè)試劑和原料純度外,一個(gè)重要的用途(三環(huán)唑中間體)就是為柱層析選擇適當(dāng)?shù)牧芟磩?